La norma specifica un metodo per la determinazione del potenziale estrogenico dell'acqua e delle acque reflue mediante un test del gene reporter che utilizza cellule umane stabilmente trasfettate. Questo saggio del gene reporter si basa sull'attivazione del recettore alfa degli estrogeni umani.
Questo metodo è applicabile a:
- acqua dolce;
- acque reflue;
- acqua di mare;
- acqua salmastra;
- estratti acquosi e percolati;
- eluati di sedimenti (acqua dolce);
- acqua interstiziale;
- soluzioni acquose di singole sostanze o di miscele chimiche;
- acqua potabile.
Il limite di quantificazione (LOQ) di questo metodo per l'analisi diretta di campioni d'acqua è compreso tra 0,3 ng/L e 1 ng/L di 17β-estradiolo equivalenti (EEQ) sulla base dei risultati della prova interlaboratorio internazionale (vedi allegato F). Il range di lavoro superiore è stato valutato [sulla base dei risultati dello studio interlaboratorio internazionale (vedi Tabella F.3)] fino a un livello di 75 ng EEQ/L. I campioni che mostrano potenze estrogeniche superiori a questa soglia devono essere diluiti per una quantificazione valida. L'estrazione e la preconcentrazione dei campioni d'acqua possono rivelarsi necessari se il loro potenziale estrogenico è inferiore al LOQ indicato.